技術(shù)簡介
染色質(zhì)免疫沉淀測序(Chromatin Immunoprecipitation Sequencing,ChIP-seq)是一種將染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)與二代測序技術(shù)(NGS)相結(jié)合,用于研究蛋白質(zhì)與DNA的相互作用的技術(shù)。
技術(shù)原理
將染色質(zhì)免疫共沉淀和高通量測序相結(jié)合,通過目的蛋白的特異性抗體,將目的蛋白-DNA復(fù)合物沉淀下來,從而獲取該目的蛋白結(jié)合的DNA。再通過DNA高通量測序,獲得該蛋白在染色體上的分布情況。利用該技術(shù)不僅可以檢測轉(zhuǎn)錄因子在全基因組上的結(jié)合位點(diǎn),還可以研究各種組蛋白修飾在全基因組上的分布情況。
應(yīng)用領(lǐng)域
1.癌癥研究:
鑒定腫瘤特異性表觀遺傳標(biāo)記(如SETD2突變導(dǎo)致的H3K36me3缺失),發(fā)現(xiàn)潛在治療靶點(diǎn)。
解析癌基因與抑癌基因的調(diào)控機(jī)制,為個(gè)性化治療提供依據(jù)。
2.發(fā)育生物學(xué):
追蹤胚胎發(fā)育過程中組蛋白修飾的動(dòng)態(tài)變化,揭示細(xì)胞命運(yùn)決定的表觀遺傳機(jī)制。
研究干細(xì)胞分化過程中關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子(如Oct4、Sox2)的結(jié)合模式。
3.神經(jīng)科學(xué):
探索神經(jīng)元活動(dòng)依賴的表觀遺傳調(diào)控,如學(xué)習(xí)記憶相關(guān)基因的染色質(zhì)重塑。
4.農(nóng)業(yè)與微生物學(xué):
解析作物經(jīng)濟(jì)器官(如種子、果實(shí))的表觀遺傳圖譜,助力抗逆育種。
研究微生物中DNA-蛋白質(zhì)互作,揭示抗生素耐藥性機(jī)制。
技術(shù)流程
分析流程
部分結(jié)果示例